HOOK™ 6X спиновая очистка его белка (дрожжи) G-Biosciences

HOOK™ 6X His Protein Spin Purification Набор позволяет быстро очистить растворимый 6X His-меченный белок из дрожжевых культур. Дрожжи сначала лизируют дрожжами PE LB™ и LongLife™ Zymolyase® для высвобождения всего растворимого белка, сохраняя при этом структуру и активность белка. Белок, меченный 6X His, очищают с помощью аффинной хроматографии с иммобилизованным металлом (IMAC) путем добавления 0,5 мл аффинной смолы с иммобилизованным металлом к ??осветленному лизату. Смолу переносят в удобную центрифугу, где ее быстро промывают и 6X His-белок элюируют имидазольным буфером.

Дрожжи-PE LB™ полезны для экстракции растворимых белков из дрожжевых клеток. Дрожжи PE LB™ — это запатентованная разработка технологии получения сферопластов на основе Zymolyase® и экстракции растворимых белков из дрожжевых клеток. Дрожжи PE LB™ основаны на органических буферных агентах, в которых используются мягкие неионогенные детергенты и запатентованная комбинация различных солей и агентов для улучшения экстракции и стабильности белков. Также предоставляется готовый к использованию препарат Зимолиаза®. В зависимости от применения в дрожжи PE LB™ могут быть добавлены дополнительные агенты, такие как ингибиторы протеазы. Запатентованная комбинация этого реагента обеспечивает простой и универсальный метод экстракции дрожжевого белка. Дрожжи PE LB™ устраняют необходимость трудоемкого лизиса дрожжевых клеток стеклянными шариками.

HOOK™ 6X His Protein Spin Purification доступен с никель-хелатной смолой или кобальт-хелатной смолой для аффинной хроматографии с иммобилизованным металлом. Кобальтовая хелатная смола имеет более низкое сродство к связыванию 6X His-меток по сравнению с никелевой хелатной смолой, что приводит к меньшему неспецифическому связыванию и может привести к несколько более низким выходам.

HOOK™ 6X His Protein Spin Purification Kit оптимизирован для получения ~1 мг растворимого белка, меченного His, с чистотой 80–90 %, в зависимости от уровня экспрессии, типа смолы, конформации и характеристик растворимости белка.

Для более масштабного выделения белка из бактерий мы рекомендуем наши наборы для гравитационного потока для >10 мг белка из дрожжей.

Особенности

• Изолят >1 мг белков, меченных His, из дрожжей
• Обработка ультразвуком не требуется, поставляется с лизирующим буфером и ферментом
• Доступны никелевые или кобальтовые смолы.
• Формат спин-колонки

Приложения

• Формат спин-колонки для выделения 6X рекомбинантных белков, меченных His, из дрожжей