HOOK™ 6X спиновая очистка его белка (бактерии) G-Biosciences

HOOK™ 6X His Protein Spin Purification Набор позволяет быстро очистить растворимый 6X His-меченный белок из бактериальных культур.

Бактерии сначала лизируются бактериальным PE LB™ и PE LB™-лизоцимом для высвобождения всего растворимого белка, сохраняя при этом структуру и активность белка. Белок, меченный 6X His, очищают с помощью аффинной хроматографии с иммобилизованным металлом (IMAC) путем добавления 0,5 мл аффинной смолы с иммобилизованным металлом к ??осветленному лизату. Смолу переносят в удобную центрифугу, где ее быстро промывают и 6X His-белок элюируют имидазольным буфером. Набор

Bacterial-PELB™ был разработан для экстракции растворимых белков из бактериальных клеток. Это запатентованное усовершенствование лизозима на основе лизоцима, которое позволяет экстрагировать растворимые белки и одновременно удалять нуклеиновые кислоты (DNA и RNA), высвобождаемые во время лизиса клеток. Лизис Bacterial-PE LB™ устраняет повышение вязкости, обеспечивая эффективное осветление при более низкой центробежной силе. Никакой ультразвуковой обработки не требуется.

HOOK™ 6X His Protein Spin Purification доступен с никель-хелатной смолой или кобальт-хелатной смолой для аффинной хроматографии с иммобилизованным металлом. Кобальтовая хелатная смола имеет более низкое сродство к связыванию 6X His-меток по сравнению с никелевой хелатной смолой, что приводит к меньшему неспецифическому связыванию и может привести к несколько более низким выходам.

HOOK™ 6X His Protein Spin Purification Kit оптимизирован для получения ~1 мг/50 мл культуры растворимого белка, меченного His, с чистотой 80–90 %, в зависимости от уровня экспрессии, типа смолы, конформации и характеристик растворимости белка.

Для более масштабного выделения белка из бактерий мы рекомендуем наши наборы для гравитационного потока для >10 мг белка из ~250 мл бактерий.

Особенности

• Изолят >1 мг белков, меченных His, из ~50 мл бактериальной культуры
• Обработка ультразвуком не требуется, поставляется с лизирующим буфером и ферментом
• Доступны никелевые или кобальтовые смолы.
• Формат спин-колонки

Приложения

• Формат спин-колонки для выделения 6X рекомбинантных белков, меченных His, из бактерий