- Производитель:
- G-BioSciences
Protocols.io предоставляет интерактивную версию этого протокола, где вы можете находить оптимизации и делиться ими с исследовательским сообществом.
Высокочувствительный колориметрический анализ белков, который устраняет влияние обычных лабораторных агентов, присутствующих в белковых растворах, и демонстрирует минимальные различия между белками. На анализ не влияет присутствие обычных лабораторных агентов, таких как восстановители, хелатирующие агенты, детергенты, амины, сахара, хаотропы, соли, лекарства, антибиотики, кобальт и другие распространенные лабораторные агенты (см. таблицы 1 и 2).
Анализ белка NI™ состоит из двух простых этапов:
- Универсальный осаждающий белок агент (UPPA™) добавляется к белковым растворам для быстрого осаждения общего белка. Белок иммобилизуют центрифугированием, а мешающие агенты из супернатанта удаляют.
- Концентрацию белка определяют путем смешивания со щелочным раствором, содержащим известную концентрацию соли меди; ионы меди связываются с основной цепью пептида, и анализ измеряет несвязанные ионы меди (см. рисунок 2). Анализ не зависит от боковых цепей белка, что сводит к минимуму вариации между белками (см. Рисунок 3). Плотность цвета обратно пропорциональна количеству белка.
Анализ поставляется с традиционным стандартом белка бычьего сывороточного альбумина (BSA) или стандартом белка неживотного происхождения.
Особенности- Линейный ответ 0,5–50 мкг белка
- Требуется небольшой образец, всего 1–50 мкл
- Не подвержен влиянию небелковых химикатов и агентов.
- Время протокола: ~30 минут
- Длительный срок хранения
Приложения
- Оценка белка во время очистки белков, электрофореза, клеточной биологии, молекулярной биологии и других исследовательских приложений.
- Подходит для образцов белка, содержащих обычные лабораторные агенты, например восстановители.
(?-меркаптоэтанол, дитиотреитол), хелатирующие агенты (EDTA), детергенты, амины (Трис), сахара и многие другие агенты. - Подходит для образцов, содержащих хаотропные агенты, такие как мочевина, тиомочевина, гидрохлорид гуанидина, тиоцианат гуанидина, сульфат аммония, лекарства, антибиотики, кобальт и многие другие агенты и буферы для экстракции.
- Подходит для определения концентрации белка в клеточных фракциях, тканевых и клеточных лизатах и ??фракциях хроматографической очистки.
- Подходит для разбавленных белковых растворов.
| Соединение |
Концентрация |
Соединение |
Концентрация |
| Сульфат аммония |
40% |
N-октилглюкозид |
0.5% |
| Бридж® 35 |
1% |
Фосфатный буфер |
0,2М |
| CHAPS |
1% |
Саркозил |
1% |
| CHAPSO |
1% |
Азид натрия |
0,1M |
| CTAB |
1M |
Додецилсульфат натрия (SDS) |
1% |
| Дигитонин |
0.3% |
Сахароза |
30% |
| DTT |
10 мм |
TCEP |
15 мм |
| EDTA |
10 мм |
Thesit® |
2% |
| Глицерин |
30% |
Тиомочевина |
2M |
| Гуанидин.HCl |
6M |
Трис |
0,2М |
| Гуанидинтиоцианат |
6M |
Тритон® Х-100 |
3% |
| HEPES |
0,1M |
Тритон® X-114 |
1% |
| Йодоацетамид |
15 мм |
Твин® 20 |
2% |
| 2-меркаптоэтанол |
0.5% |
Мочевина |
8M |
Таблица 2. Анализ белка NI™ совместим с сильными хаотропными буферами для экстракции.
| Состав буфера | Состав буфера |
| 4M мочевина, 1% SDS, 10 мМ EDTA, 0,8% 2-меркаптоэтанол | 1% саркозил, 0,8% 2-меркаптоэтанол, 4М гуанидинтиоцианат, 10 мМ EDTA |
| 6M мочевина, 2M тиомочевина, 4% CHAPS | 6M мочевина, 2M тиомочевина, 2% CHAPS, 2% ND SB 201 |
| 6М мочевина, 2М тиомочевина, 4% Нонидет® P-40 | 6M мочевина, 2M тиомочевина, 2% CHAPS, 2% SB 2 10 |
| Описание | Размер | Кат. номер |
| NI™ (Non-Interfering™) Набор для анализа белка со стандартом альбумина | 500 анализов | 786-005 |
| NI™ (Non-Interfering™) Набор для анализа белка со стандартом белка неживотного происхождения | 500 анализов | 786-896 |
Получите коммерческое предложение в течение 1 часа
Менеджер подготовит коммерческое предложение и позвонит, если понадобится уточнить детали вашего заказа
С 2010 года мы поставляем оборудование с заводов Европы. Берем на себя все — от подбора оборудования до внедрения на предприятии
Все сотрудники имеют высшее образование, закончили ведущие химические вузы страны, такие как РХТУ им Менделеева.
У большинства компаний срок ожидания составляет 10-12 недель.
Оборудование хранится на сухом отапливаемом складе, где поддерживается ровная температура.
Работаем с PonyExpress и Деловыми линиями. Вы также можете выбрать свою транспортную компанию или забрать товар со склада в Москве.
В случае любых неполадок за свой счет выполним ремонт в сервисном центре или на заводе-изготовителе. Или бесплатно заменим прибор на новый.
Производим пуско-наладку оборудования, валидацию, обучение сотрудников. Если нужно, привлекаем инженеров с заводов- изготовителей.