Perfect-FOCUS™ G-Biosciences

Образцы белка, загруженные в гели с изоэлектрической фокусировкой (IEF), в идеале должны иметь низкую проводимость и не содержать агентов, которые, как известно, влияют на суммарный заряд белка. Образцы белков, содержащие мешающие агенты, включая ионные детергенты, ионы металлов, соли, липиды, заряженные полисахариды, пептиды, нуклеиновые кислоты, ферментные субстраты, аналоги субстратов, ингибиторы, растительные продукты (фенолы и т. д.) и другие агенты, имеющие заряд, обычно приводят к образованию размазанных гелей или гелей с низким разрешением. С другой стороны, когда белковый раствор разбавлен, может быть трудно загрузить необходимое количество белка в гель без предварительного концентрирования белкового раствора.

Perfect-FOCUS™ основан на количественном осаждении и концентрировании белковых растворов с использованием UPPA™ (универсального агента для осаждения белков) и был специально разработан для подготовки образцов белков с низкой проводимостью для изоэлектрофокусирующих гелей. Perfect-FOCUS™ предназначен для очистки и удаления мешающих агентов из образцов белка и концентрирования белковых растворов, что приводит к плохому разрешению белковых пятен во время 2D-электрофореза.

Растворы белков, разбавленные до 1 нг/мл, при обработке Perfect-FOCUS™ можно количественно осадить в небольшой объем. На осаждение белка не влияет присутствие моющих средств или других распространенных лабораторных агентов. После осаждения осадок промывают для удаления солей и других веществ, не мешающих белку. На этом этапе белковый осадок готов к солюбилизации и восстановлению в небольшом объеме буфера для загрузки образца, а затем загружен в гель для электрофореза для получения идеальных моделей миграции белка.

Собранный образец белка имеет проводимость примерно от 40 до 50 мкСм и практически не содержит небелковых агентов, что делает образец белка идеальным для критических исследований IEF и 2D-гель-электрофореза с улучшенным разрешением пятна и значительно уменьшенным появлением пятен. При правильном соблюдении протокола выздоровление обычно составляет 100%. Образцы белка, обработанные Perfect-FOCUS™, совместимы с масс-спектрометрическим анализом и демонстрируют идентичные пептидные спектры.

Особенности

После лечения Perfect-FOCUS™:

• Проводимость ниже 50 мкСм
• Образцы не содержат агентов, не мешающих белкам.
• Значительно уменьшено количество полос и улучшено разрешение точек.
• Идеальные модели миграции белков
• Подходит для работы с 2D-гелями и совместим с масс-спектрометрическим анализом.
• Обработка до 50 образцов белка (или 6 с набором пробного размера), 1–100 мкл/каждый

Приложения

• Подготовьте образцы с низкой проводимостью для IEF (изоэлектрофокусирование) и двумерного гель-электрофореза.
• Концентрат и чистые образцы белка
• Удаление мешающих агентов из белковых растворов
• Улучшите разрешение белковых пятен и подготовьте 2D-гели без полос.