FOCUS™ Буферы для экстракции G-Biosciences

Хаотропные экстракционные буферы, сохраняющие нативный заряд белков, благодаря которым ониподходит для извлечения проб из 2D-гелей.

Одним из наиболее важных вопросов перед проведением 2D-гель-электрофореза является выбор буферов для солюбилизации белков. Подходящий буфер должен эффективно солюбилизировать белки, не нарушая их нативный заряд.

Мочевина, распространенный хаотроп, широко используется для солюбилизации и денатурации белков. Одним из недостатков использования мочевины является карбамилирование. В воде мочевина находится в равновесии с цианатом аммония, уровень которого увеличивается с повышением температуры и pH. Цианат реагирует с ?-амино- и ?-аминогруппами белков и вызывает изменение изоэлектрической точки белков. Это приводит к артефактным результатам. Поэтому следует избегать карбамилирования.

Одним из способов минимизировать риск карбамилирования является приготовление свежих реагентов на основе мочевины перед каждым использованием. Компания G-Biosciences разработала серию сухих предварительно смешанных и готовых к использованию растворяющих буферов на основе мочевины. Просто добавьте соответствующий объем прилагаемого регидратационного буфера к сухому буферу. Затем используйте для солюбилизации белков, экономя время и улучшая качество гель-электрофореза IEF/2D (заявка на патент подана).

FOCUS™ Экстракционные буферы также предназначены для использования в качестве буферов для регидратации стрипов IPG.

FOCUS™ Экстракционные буферы представляют собой экспериментально оптимизированные концентрации критических, буферных и стабилизирующих агентов, включая мочевину, тиомочевину, Nonidet® P-40, CHAPS и сульфобетаины. Буферы для экстракции FOCUS™ предназначены для оптимальной экстракции белков и улучшения точечного разрешения для двумерного анализа геля.

Был разработан ряд буферов для экстракции FOCUS™. В зависимости от характера образцов можно заказать один или несколько буферов, подходящих для ваших задач. FOCUS™ Extraction Buffer-I подходит для большинства применений; однако для более сильного эффекта растворения мы рекомендуем FOCUS™ Extraction Buffer-II, -III, -IV, -V или -VI. Также доступен пробный набор, который содержит все шесть буферов для экстракции FOCUS™ и каждый из соответствующих им разбавителей. Пробный набор предназначен для тех, кто предпочитает экспериментировать с поиском подходящего буфера для экстракции и солюбилизации для образцов белка.

Доступны следующие буферы для экстракции FOCUS™, перечисленные с указанием их основных компонентов:

Для анализа протеома один буфер может оказаться непригодным, а последовательная солюбилизация с использованием различных буферов для экстракции FOCUS™ поможет идентифицировать больше и новые белки (см. рисунок 1). Дополнительную информацию см. в примечаниях по применению в техническом разделе ниже.

Особенности

• Удобен и прост в использовании: просто увлажните и используйте.
• Предотвращает карбамилирование белка, вызванное мочевиной.
• Предотвращает потерю неиспользованных реагентов.
• Отсутствие артефактных белковых полос из-за загрязнения пылью и кожей человека.

Приложения

• Оптимальная экстракция и солюбилизация белков для 2D-гель-электрофореза и других применений
• Регидратационный буфер для IPG-полосок
• Улучшенное точечное разрешение для двумерного анализа геля.