Ni-NTA Смола G-Biosciences

Смола Ni-NTA в виде высокосвязывающей, заряженной никелем смолы IMAC с высокой емкостью, которая очищает рекомбинантные белки с полигистидиновой (6XHis) последовательностью. Смола представляет собой агарозу с 6% поперечно-сшитой структурой, обеспечивающую превосходную структурную целостность, с высокой емкостью 20-40 мкмоль Ni2+/мл смолы, что приводит к высокой способности связывания белков >50 мг белка на мл смолы. Фактически, мы продемонстрировали связывание >100 мг/мл смолы с белком, меченным 6XHis, массой 50 кДа. Доступен в виде готовой к использованию смолы в 5 удобных размерах (10, 25, 100, 500 и 2 x 500 мл) или поставляется в расфасованном виде в различных форматах центрифужных колонок (0,2, 1 и 3 мл) и центрифужных планшетах.

Особенности

• Высокая емкость: >50 мг/мл
• Плотность лиганда: 20–40 мкмоль Ni2+/мл смолы.
• Структура гранул: 6% сшитой агарозы.
• Использует нитрилотриуксусную кислоту (NTA), тетраденатный хелатирующий лиганд.
• Для очистки 6x белков His

Аффинная хроматография с иммобилизованными ионами металлов (IMAC), разработанная Поратом (1975), основана на взаимодействии определенных белковых остатков (гистидинов, цистеинов и в некоторой степени триптофана) с катионами переходных металлов. Смола Ni-NTA специально разработана для очистки рекомбинантных белков, слитых с полигистидиновой (6XHis) меткой, экспрессируемой в бактериях, насекомых и клетках млекопитающих. Смола обладает высоким сродством и селективностью к рекомбинантным слитым белкам, меченным шестью тандемными остатками гистидина. Смола Ni-NTA может быть использована для очистки белков, меченных 6X His, в нативных и денатурирующих условиях. Белки, связанные со смолой, можно элюировать буфером с низким pH или конкурировать с имидазолом или гистидином. В смоле Ni-NTA используется нитрилотриуксусная кислота (NTA), тетраденат-хелатирующий лиганд, в сильно сшитой 6%-ной агарозной матрице. NTA связывает ионы Ni2+ четырьмя координационными центрами.

Спин-колонки поставляются с объемом слоя смолы 0,2, 1 и 3 мл при общем объеме колонки 1, 8 и 22 мл соответственно. Колонки можно использовать в качестве спин-формата гравитационных колонок. Также доступны 96-луночные спин-планшеты для обработки до 96 образцов.

Также доступны иммобилизованные IDA никелевые, медные, кобальтовые и цинкхелатные смолы и кобальтовая смола NTA. Кобальт имеет самую высокую селективность, за ним следуют цинк, никель, затем медь, но у него самая низкая связывающая способность. Медь имеет самую высокую связывающую способность, за ней следует никель, затем цинк.

Доступны специфические буферы для связывания/промывки и элюирования.

Наши наборы для очистки HOOK™ 6X His Protein Purification включают все необходимое для очистки белков, меченных 6X His, из дрожжей или бактерий, включая буферы для лизиса, литические ферменты, смолу, колонки и буферы для связывания, промывки и элюирования. Каждый комплект доступен с никелевыми или кобальтовыми хелатными смолами. Доступные комплекты:

• HOOK™ 6X Очистка белка His (бактерии): Выделение из бактерий; оптимизирован для получения до 10 мг/250 мл культуры растворимого белка, меченного 6X His.
• HOOK™ 6X His Белковая спиновая очистка (бактерии): выделение из бактерий; оптимизировано для получения культуры ~1 мг/50 мл растворимого 6X His-меченного белка
• HOOK™ 6X Очистка белка His (дрожжи): Выделение из дрожжей; оптимизирован для получения до 10 мг растворимого белка, меченного 6X His.
• HOOK™ 6X Очистка спина белка His (дрожжи): Выделение из дрожжей; оптимизирован для получения до 1 мг растворимого белка, меченного 6X His.