Анализы для количественного определения белка G-Biosciences

Определение концентрации белка является важным методом во всех аспектах исследований белков и протеомики.

Набор «Анализ для количественного определения белка» включает три наиболее широко используемых анализа белка и позволяет проводить прямое сравнение трех анализов, что знакомит студентов с преимуществами и недостатками каждого анализа. Каждый анализ доступен индивидуально, что позволяет обучать конкретному анализу без возможности сравнения и сопоставления с другими анализами. Три рассматриваемых анализа: анализ белка с биуретом, анализ белка Лоури и анализ белка с кумасси синим красителем.

Биуретовый анализ представляет собой анализ белков на основе ионов меди, растворы белков смешиваются с щелочным раствором соли меди и ионов меди (Cu2+). Анализ белка основан на взаимодействии ионов меди с белком в щелочном растворе. Взаимодействие ионов меди (Cu2+) с белком приводит к фиолетовому цвету, который можно прочитать на длине волны 545 нм. Количество производимого цвета пропорционально концентрации белка.

В щелочных условиях ионы меди (Cu2+) хелатируются с пептидными связями, что приводит к восстановлению ионов меди (Cu2+) до ионов меди (Cu+). Ионы меди можно обнаружить с помощью реагента Фолина Чиокальтеу (фосфомолибденовая/фосфорновольфрамовая кислота); этот метод обычно называют методом Лоури. Восстановление реагента Фолина Чокальтеу ионами меди (Cu+) дает синий цвет, который можно определить при длине волны 650-750 нм. Количество производимого цвета пропорционально количеству пептидных связей.

Анализ белка с использованием кумасси синего красителя основан на связывании белковых молекул с красителем кумасси в кислых условиях. Связывание белка с красителем приводит к спектральному сдвигу, цвет раствора Кумасси меняется от коричневого (максимум поглощения 465 нм) к синему (максимум поглощения 610 нм). Изменение плотности цвета считывается при длине волны 595 нм и пропорционально концентрации белка.

Набор «Анализ для количественного определения белка» содержит все реагенты, необходимые для проведения обоих анализов белка, включая стандарты белка для точного количественного определения, в рамках одного лабораторного мероприятия. Часто недооцениваемым фактором при количественном определении белка является наличие агентов, не мешающих белку, таких как соли и детергенты. Этот комплект знакомит учащихся с распространенными лабораторными агентами, влияющими на анализ белка, причинами их вмешательства и способами их преодоления. Студенты также узнают, как выбрать анализ белка для различных целей.

Анализы белка также предлагаются отдельно для тех, кто предпочитает использовать отдельные анализы белка:

1. Анализ биуретового белка (BE-402B)

2. Анализ белка Лоури (BE-402L)

3. Анализ белка с использованием кумасси синего красителя (BE-402C)

Поставляется с компонентами, необходимыми для практических экспериментов на шести рабочих станциях для 4–5 учащихся или 24–30 учащихся. Поставляется с руководством для учителя и отдельными руководствами для учащихся.

• Три анализа белка или отдельные анализы.

Приложения

• Обучает трем широко используемым методам оценки.
• Анализы белков с использованием биурета, Лоури и кумасси.
• Изучите влияние обычных лабораторных агентов на оценку белка.