Коррекция генетических дефектов с помощью бактериальной трансформации G-Biosciences

Основная цель генной инженерии — получить возможность исправлять генетические дефекты для лечения генетических заболеваний, таких как муковисцидоз, серповидноклеточная анемия и болезнь Хантингтона.

Одним из методов исправления генетических дефектов у бактерий является введение исправленного гена обратно в бактерии с использованием плазмид. Этот метод известен как а-комплементация. Дополнительным преимуществом альфа-комплементации является то, что ее можно использовать для скрининга рекомбинантных плазмид.

Многие используемые в настоящее время клонирующие векторы кодируют регуляторные последовательности и N-конец b-галактозидазы. Внутри этой кодирующей области находится сайт клонирования для вставки рекомбинантного DNA. Эти векторы трансформируются в бактерии, которые кодируют карбокси-конец b-галактозидазы. Ни плазмида, ни бактерии не могут кодировать активный фермент; вместе они дополняют друг друга, производя активную b-галактозидазу.

Если колонии выращивать на чашках, содержащих ферментный субстрат 5-бром-4-хлор-3-индолил-b-D-галактозид (X-гал), образуются синие колонии. Если в плазмиды клонирован рекомбинантный DNA, они не образуют аминоконец, что приводит к образованию белых колоний. Этот сине-белый скрининг позволяет исследователям быстро идентифицировать колонии с рекомбинантным DNA.

Этот набор предназначен для обучения студентов тому, как можно исправить генетический дефект бактерий путем переноса правильной последовательности DNA - метод, обычно называемый комплементацией.

Поставляется с компонентами, необходимыми для практических экспериментов на шести рабочих станциях для 4–5 учащихся или 24–30 учащихся. Поставляется с руководством для учителя и отдельными руководствами для учащихся.

Приложения

• Обучает бактериальной комплементации.
• Студенты используют сине-белый бактериальный скрининг.
• Включает трансформацию бактерий и выбор антибиотиков.