CB-X™ Анализ белка G-Biosciences

Protocols.io предоставляет интерактивную версию этого протокола, где вы можете находить оптимизации и делиться ими с исследовательским сообществом.

Анализы белков обычно используются во многих областях исследований для оценки белков в широком спектре буферов и условий. Основная проблема для исследователей состоит в том, чтобы выбрать из огромного выбора на рынке анализ белка, который совместим с их образцом белка. CB-X™ Protein Assay устраняет эту проблему, поскольку он совместим со всеми обычно используемыми буферами и условиями при выделении, хранении и анализе белков.
Для образцов белка в простых, несложных водных буферах CB-X™ представляет собой высокочувствительный анализ с одним реагентом, который можно выполнить за 5 минут. В анализе белка CB-X™ используется белковый краситель, который является усовершенствованной версией реагента красителя Брэдфорда Кумасси (рис. 1). Для сложных образцов белка в комплект поставки CB-X™ Protein Assay входят реагенты для очистки образцов и удаления всех реагентов и химикатов, мешающих точному определению содержания белка (рис. 1). Эти реагенты включают детергенты, хаотропы, восстановители, алкилирующие агенты, сахара, соли высокой концентрации, буферные агенты и хелатирующие агенты (таблица 1). Стадия очистки и последующий анализ белка выполняются в одной пробирке, чтобы исключить потерю белка и сохранить точность анализа. Рисунок 2 демонстрирует эффект CB-X™ в присутствии 1% Triton® X-100 или 1% SDS.

Если образец белка не содержит мешающих агентов, для получения линейного ответа выполняется простой анализ с использованием одного реагента. Если присутствуют мешающие агенты или получены артефактные результаты, образцы белка обрабатывают реагентами для очистки и анализируют белок для получения линейного ответа.

CB-X™ Protein Assay поставляется с таблицами CB-X™ для каждой партии. Это позволяет исследователям выполнять очистку отдельных белков, последующие анализы, а затем просматривать их поглощение в таблице CB-X™, чтобы определить концентрацию белка. Таблица CB-X™ устраняет необходимость использования нескольких стандартов белка и экономит значительное время и усилия. Таблица составлена ??из сложной белковой смеси, которая хорошо сочетается с белками млекопитающих, растений, бактерий и дрожжей. Анализ поставляется со стандартом белка BSA или стандартом белка неживотного происхождения по кат. № 786-12X или 786-894 соответственно для создания кривых при использовании только аналитического красителя CB-X™ или для исследователей, которые предпочитают создавать собственную стандартную кривую или собственную таблицу CB-X™ в соответствии со своими конкретными условиями.

Анализ белка CB-X™ надежен в диапазоне 0,5–50 мкг на анализ. В комплект стандартного размера входит краситель CB-X™ для проведения 500 анализов белка и реагентов для очистки на 250 анализов. (подана заявка на патент) Таблица 1. Анализ белка CB-X™ совместим со многими мешающими агентами.

DETERGENTS		REDUCING AGENTS
Бридж® 35	2%	2-меркаптоэтанол	1M
CHAPS	2%	DTT	1M
CHAPSO	2%	CHAOTROPES
Нонидет® P-40	2%	Гуанидин.HCl	6M
SDS	2%	Мочевина	6M
Тритон® Х-100	2%	SALTS
Твин® 20	2%	Сульфат аммония	1M
Дезоксихолат	0.1%	MISCELLANEOUS
SUGARS		EDTA	0,1M
Глюкоза	1M	HEPES	0,1M
Сахароза	25%	MES	0,1M

Особенности

• Уникальный этап очистки удаляет все мешающие вещества, включая моющие средства и хаотропы, для повышения точности.
• Очистка и анализ выполняются в одной пробирке, чтобы гарантировать потерю белка NO.
• Чувствительный: линейный отклик 0,5–50 мкг
• Высокая надежность и воспроизводимость
• Длительный срок хранения – стабильный в течение 12 месяцев.

Приложения

• Улучшенный чувствительный анализ Брэдфорда для большинства образцов, включая проблемные образцы, совместимый с обычными лабораторными агентами ALL.
• CB-X™ использовался в широком спектре методов (ссылки 1–6) и приложений, включая:
  • Оценка белка при очистке белков, электрофорезе, иммуноанализе, клеточной биологии, молекулярной биологии и других исследовательских приложениях
  • Образцы белков, содержащие обычные лабораторные агенты, мембранные белки, растворимые в детергентах, и разбавленные белковые растворы.

Описание	Размер	Кат. номер
CB-X™ Анализ белка	10 анализов	786-12XT
CB-X™ Анализ белка (нет стандарта BSA)	500 анализов	786-11X
CB-X™ Анализ белка со стандартом альбумина	500 анализов	786-12X
CB-X™ Анализ белка со стандартом белка неживотного происхождения	500 анализов	786-894