SAM510™: анализ SAM метилтрансферазы G-Biosciences 786-430

Анализ SAM510™: SAM метилтрансферазы представляет собой непрерывный кинетический анализ, связанный с ферментами, который позволяет непрерывно контролировать очищенные SAM-зависимые метилтрансферазы без использования радиоактивных меток или измерений конечных точек. Это чувствительный ферментативный анализ на белок SAM-метилтрансферазы.

Метилирование ключевых биологических молекул и белков играет важную роль во многих биологических системах, включая передачу сигналов, биосинтез, репарацию белков, подавление генов и регуляцию хроматина.

S-аденозилметионин (SAM)-зависимые метилтрансферазы используют SAM, второй наиболее часто используемый ферментативный кофактор после ATP. SAM, также известный как AdoMet, действует как донор метильной группы, необходимой для модификации белков и DNA. Аберрантные уровни SAM связаны со многими отклонениями, включая болезнь Альцгеймера, депрессию, болезнь Паркинсона, рассеянный склероз, печеночную недостаточность и рак.

На рисунке 1 представлена ??общая схема анализа. По сути, удаление метильной группы из SAM приводит к образованию S-аденозилгомоцистеина, который быстро превращается в S-рибозилгомоцистеин и аденин с помощью включенной аденозилгомоцистеиннуклеозидазы. Это быстрое преобразование предотвращает накопление аденозилгомоцистеина и его ингибирование по принципу обратной связи в реакции метилирования. Наконец, аденин превращается под действием адениндезаминазы в гипоксантин, который, в свою очередь, превращается в ураты и перекись водорода. Скорость образования перекиси водорода измеряют колориметрическим анализом по увеличению оптической плотности при длине волны 510 нм.

Анализ можно адаптировать для использования с любой очищенной SAM-зависимой метилтрансферазой или очищенным ферментом, продуцирующим 5-аденозилгомоцистеин или 5'-метилтиоаденозин, в связи со специфичностью аденозилгомоцистеиннуклеозидазы.

В комплект поставки входит достаточное количество реагентов для анализа в микролунках объемом 100 x 115 мкл.

Также доступен флуоресцентный анализ SAM метилтрансферазы.

Особенности

• Кинетический анализ очищенных метилтрансфераз или скрининг ингибиторов метилирования.
• Непрерывный ферментный анализ для кинетических исследований.
• Колориметрический нерадиоактивный анализ.
• Поставляется со всеми реагентами, включая положительный контроль.
• Адаптируется для ферментов, генерирующих S-аденозилгомоцистеин или 5'-метилтиоаденозин.

Приложения

• Для кинетического анализа ферментов белка SAM метилтрансферазы.
• Идеально подходит для скрининга ингибиторов метилтрансферазы.