Дезоксирибонуклеаза I из поджелудочной железы быка Sigma-Aldrich p2922-500un

Номер CAS	9003-98-9
Номер Комиссии по ферментам (EC)	3.1.21.1 ( BRENDA | IUBMB )
Номер ЕС	232-667-0
Номер MDL	MFCD00130918

Общее описание
ДНКаза I, или дезоксирибонуклеаза I, — это эндонуклеаза, выделенная из поджелудочной железы быка.
Наша ДНКаза I расщепляет двухцепочечную и одноцепочечную ДНК на олиго- и мононуклеотиды.
Бычья панкреатическая ДНКаза существует в виде четырех изоферментов, имеющих изоэлектрические точки для A, B, C и D: 5,22, 4,96, 5,06 и 4,78,3. Преобладающей формой является A, с меньшими количествами B и C, и только незначительным количеством D.
Структура ДНКазы I напоминает структуру экзонуклеазы III. Она включает два центральных листа. Каждый лист состоит из шести -тяжей. Этот комплекс листов окружен обширными петлевыми и -спиральными областями. Этот фермент имеет структурное сходство с экзонуклеазой III.
[1]

Приложение
Снижает вязкость, обеспечивая лучшие выходы за счет удаления ДНК при первичной изоляции клеток:
Включение меченых оснований в ДНК: надрез ДНК
Радиоактивная маркировка
Биотехнологические приложения: удаление ДНК
Удаление геномной ДНК из препаратов РНК перед ОТ-ПЦР
Транскрипция in vitro
Перевод Ника
ДНКазный футпринтинг
Регуляция актином полимеризации актина в клетках и апоптоз клеток
УФ-сшивание белков с нуклеиновыми кислотами
ДНКаза играет роль в регуляции полимеризации актина в клетках и участвует в процессе апоптоза.
[1]
Используется для удаления ДНК из образцов белка.

Упаковка
10, 100 мг в полимерном флаконе
1, 5 г в полимерном флаконе

Биохимические/физиотерапевтические действия
ДНКаза I — это эндонуклеаза, которая действует на фосфодиэфирные связи, соседствующие с пиримидинами, для получения полинуклеотидов с концевыми 5-фосфатами. В присутствии Mg2+ ДНКаза I расщепляет каждую нить ДНК независимо, и места расщепления являются случайными. Обе нити ДНК расщепляются примерно в одном и том же месте в присутствии Mn2+. Двухвалентные катионы, такие как Mn2+, Ca2+, Co2+ и Zn2+, являются активаторами фермента. Концентрация 5 мМ Ca2+ стабилизирует фермент против протеолитического переваривания. Оптимум pH находится между 7 и 8. ДНКаза I из поджелудочной железы быка состоит из четырех хроматографически различимых компонентов, A, B, C и D, с их молярными соотношениями 4:1:1 соответственно. Обнаружены только незначительные количества D. Известно, что 2-меркаптоэтанол, хелаторы, додецилсульфат натрия (SDS) и актин подавляют активность фермента.

Особенности и преимущества
Наша дезоксирибонуклеаза ДНКаза I по сути является продуктом, не содержащим РНКазу, что облегчает применение продукта.

Определение единицы измерения
Одна единица Кунитца даст изменение A260 на 0,001 в минуту на мл при pH 5,0 и температуре 25 °C, используя ДНК типа I или III в качестве субстрата.

Физическая форма
Сырой препарат, содержит хлорид кальция

Примечание к подготовке
Раствор ДНКазы I концентрацией 10 мг/мл в 0,15 М NaCl может потерять <10% своей активности при хранении в течение недели в аликвотах при температуре −20 °C. Те же растворы, хранящиеся в аликвотах при температуре 2–8 °C, могут потерять приблизительно 20% активности. Он остается активным до пяти часов при 60 °C в диапазоне pH от 5 до 7 и теряет активность за <10 минут при 68 °C. Он теряет активность со скоростью 6%/час в ацетатном буфере (pH 5,0) и трис-буфере (pH 7,2) при концентрации 1 мг/мл.

Аналитическая записка
Белок определяют биуретом.

Параметры

Уровень качества	300
Форма	лиофилизированный порошок
Конкретная деятельность	400 единиц Кунитца/мг белка
Молярная масса	~31 кДа
Состав	Белок, 85%
Растворимость	0,15 М NaCl: растворим 5,0 мг/мл, мутный
Рекомендуемая отрасль	Производство диагностических тестов
Зарубежная деятельность	RNase 0.02%
Погруженный	во влажный лед
Температура хранения	20°С