Быстрое обнаружение микоплазменной контаминации в лекарственных препаратах для передовой терапии (ATMP) очень важно. С помощью Microsart® ATMP Mycoplasma время тестирования можно сократить с недель до трех часов. Кроме того, зонд TaqMan® повышает специфичность системы PCR и сводит к минимуму интерпретацию результатов. Microsart® ATMP Mycoplasma был эффективно проверен в соответствии с EP 2.6.7 в сочетании с EP 2.6.21 в отношении предела обнаружения для всех перечисленных видов микоплазмы, специфичности и устойчивости к трансплантатам аутологичных клеток (например, хондроцитов).
Эффективные приложения
Микоплазмы присутствуют в большинстве учреждений по культивированию клеток и лабораторий по культурам тканей. По оценкам, микоплазмы ответственны за до 60% заражения клеточных культур. Набор Microsart® ATMP Mycoplasma Real-time PCR специально разработан для больниц, учреждений и компаний, занимающихся тестированием заражения микоплазмой в соответствии с EP 2.6.7 в клеточной терапии. Его можно использовать для прямого обнаружения молликутов (микоплазмы, ахолеплазмы, спироплазмы) в клеточных культурах и биологических препаратах, полученных из клеточных культур, ATMP.
Высокая производительность
Микоплазму выявляют явно путем амплификации высококонсервативного оперона рРНК или, точнее, кодирующей области 16S рРНК в геноме микоплазмы. Микоплазмоспецифическая амплификация обнаруживается при длине волны 520 нм (канал FAM™). В комплект входит готовый к использованию Mastermix, содержащий полимеразу, праймеры и зонды, меченные FAM™ и ROX™, которые позволяют специфично обнаруживать виды молликут и осуществлять внутренний контроль. Предел обнаружения менее 10 CFU/мл для всех видов микоплазм, упомянутых в Европейской фармакопее, соответствует требованиям чувствительности, специфичности и надежности.
Предотвращение загрязнения
Набор содержит dUTP вместо dTTP, поэтому имеется возможность разлагать ампликоны из предыдущих анализов с использованием урацил-DNA гликозилазы (UNG). Таким образом, возникновение ложноположительных результатов можно свести к минимуму. UNG в комплект не входит. Внутренний контроль амплификации выявляет ложноотрицательные результаты из-за ингибиторов PCR или неправильной экстракции DNA. Внутренний контроль DNA можно добавить непосредственно в мастер-микс PCR, чтобы он действовал как элемент управления PCR или контролировал процесс экстракции. Усиление внутреннего контроля обнаруживается при 610 нм (канал ROX™). При использовании гликозилазы урацил-DNA (UNG) набор содержит dUTP вместо dTTP для разрушения ампликонов из предыдущего анализа с помощью гликозилазы урацил-DNA (UNG). Это сводит к минимуму возникновение ложноположительных результатов.